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什么是外泌体

外泌体(exosomes)是细胞外脂质纳米囊泡,大小约为30-150nm,在大多数活细胞中通过胞吐作用主动分泌,存在于所有体液中,如血浆、尿液、血清、唾液和脑脊液(CSF)等。外泌体含有脂质双分子膜结构,携带典型的跨膜蛋白和受体、粘附分子、脂肪相关蛋白、免疫调节分子。在外泌体腔内,可以发现多种蛋白质和核酸,根据不同的细胞类型而不同。

作为细胞间通讯的关键信使,外泌体将生物活性分子传递给受体细胞,从而参与多种病理生理过程,包括肿瘤、心血管疾病和神经退行性疾病等。有一系列研究报道了肿瘤来源的外泌体在肿瘤进展、免疫调节和转移中的预后发挥重要功能。目前研究发现外泌体中富含核酸(microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA 等)、蛋白、胆固醇等。外泌体的表面 marker 主要有 CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP70 等。因此,外泌体几乎可以与任何疾病相关联,成为疾病标志物、疾病机理、药物开发等研究的创新热点。

 

 

服务内容

1. 外泌体技术服务

项目类别技术服务
外泌体提取服务科研小样本提取
外泌体辅助应用开发服务功能性产品口鼻雾化可溶性微晶微针用液体喷雾冻干粉
外泌体CRO服务工业化大规模提取自研提取试剂盒工艺开发和优化药用及载药技术研究外泌体-药物纳米载体递送系统技术开发外泌体分子标志物和外泌体功能及其介导的分子机制研究安全性评价功效验证

 

2. 外泌体检测服务(以MSC来源外泌体为例)

序号检测项目标准方法
1形态呈现不聚团的具有清晰膜结构的茶托状或杯状结构,边缘清晰透射电镜观察法
2数量/纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)
3粒径分布在 30-150nm 范围内,且在范围内存在粒径峰值纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)
4标志蛋白表面标志物:CD9、CD63、CD81任意两个表达阳性;
内部标志物:Alix、TSG-101 任意一个表达阳性;
Calnexin表达阴性
免疫印迹法(WB)
5颗粒蛋白比外泌体颗粒数与蛋白量比值不低于1X108 particles/µgBCA试剂盒测总蛋白含量,按照外泌体颗粒数浓度(particles/mL)与蛋白含量(µg/ml)的比值进行计算
6微生物细菌、真菌、支原体、HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV、TP、外源病毒因子检测均应为阴性培养法;核酸法
7细菌内毒素小于0.5EU/mL凝胶法

参考标准:
《人间充质干细胞来源的小细胞外囊泡》T/CRHA·001-2021
《人源间充质干细胞外泌体制备与检验规范》T/FDSA0049-2024

 

3. 外泌体标准品

提供一系列数量准确、粒径稳定、高表达阳性标记的外泌体标准品。

 

服务优势

  • 先进技术:应用先进的提取和鉴定技术,确保服务高效、结果可靠

  • 高质量数据:专业团队进行准确分析和解读,提供可靠的结果和报告

  • 个性化方案:根据客户需求提供定制化解决方案,紧密配合研究项目

  • 保密与可靠性:严格保护客户样品和数据信息,提供安全可靠的服务

  • 快速交付:高效的实验流程和操作经验,及时交付结果,满足时间要求

 

样本种类

  • 血清/血浆

  • 盆腔冲洗液

  • 肿瘤囊肿积液

  • 关节冲洗液

  • 菌液

  • 肠道微生物样本

  • 尿液

  • 细胞培养液

 

样本要求

外泌体提取样本要求
样本类型干细胞培养液(1×1010 particle)血清样本
体积20-50mL不少于0.5mL,不超过2mL
保存温度及保存期限新鲜样品最优,2-8℃保存不超过7天新鲜样品最优,2-8℃保存不超过7天
运输要求当天或次日到可用冰袋运输当天或次日到可用冰袋运输
运输时间大于3天干冰运输运输时间大于3天干冰运输
注意事项使用不含外泌体培养体系培养,避免多次冻融避免多次冻融

 

外泌体鉴定样本要求
样本类型干细胞外泌体悬液血清外泌体悬液
体积不少于1mL不少于1mL
检测项目TEM、NTA/NanoFlow/WB
保存温度及保存期限2-8℃不超过7天2-8℃不超过7天
-80℃不超过30天-80℃不超过30天
运输要求当天或次日可到用冰袋运输当天或次日到可用冰袋运输
运输时间大于3天干冰运输运输时间大于3天干冰运输
注意事项避免多次冻融避免多次冻融
备注WB实验中外泌体悬液样本需要满足WB实验用量,结果以质控检测结果为准。

 

外泌体安全性检测样本要求
样本类型外泌体上清液
检测项目细菌、真菌支原体、HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV、TP、外源病毒因子、细菌内毒素
体积不少于30mL不少于10mL
保存温度及保存期限常规送检,2-8℃,不超过7天2-8℃不超过7天
不可-80℃冷冻-80℃不超过30天
运输要求常温或用冰袋运输当天或次日到可用冰袋运输
运输时间大于3天干冰运输
注意事项避免多次冻融避免多次冻融
备注细菌、真菌检测样本不可用干冰运输。

 

补充要求:

  1. 不同样本来源及研究目的取样事项,请提前咨询我司。

  2. 样本名字需包含字母和数字,并且不能以数字开头。

  3. 样本包装请套上自封袋,且尽量将样本置于缓冲物如泡沫垫、棉花、冻存盒内,以免运输过程中损坏。

  4. 运输冰袋干冰数量参考:根据当地温度调整冰袋数量

当地温度冰冻冰袋(个)干冰重量(kg)
0-10°C1根据容器大小添加
11-20°C3
20-40°C4

 

最终交付

  • 提取的外泌体悬液(提取服务)

  • 电镜图片

  • 外泌体粒径、浓度检测报告

  • WB检测结果

  • q-PCR相关检测结果

  • 微生物相关检测结果

  • CRO服务:根据具体项目确定交付

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